Национальный производитель
иммунобиологических препаратов в России
25 июля 2017 года, 07:33 (МСК)

Диагностикум риккетсиозный провачека для рск сухой

Срок годности

5 лет.

Производитель

Филиал ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России в г. Пермь.

Форма выпуска

Диагностикум-лиофилизат в ампулах из объема 0,5 мл, сыворотка диагностическая , лиофилизат в ампулах из объема 0,1 мл, в упаковке 10 ампул диагностикума и 3 ампулы сыворотки диагностической.

Состав

В комплект Набора реагентов входят:
Диагностикум риккетсиозный Провачека для РСК – 10 ампул;
Сыворотка диагностическая к риккетсиям Провачека для РСК – 3 ампулы.

1. Диагностикум риккетсиозный Провачека для РСК. Представляет собой антигенный комплекс, выделенный методом эфирной обработки из риккетсий Провачека вирулентного штамма «Брейнль», выращенных в желточных мешках развивающихся куриных эмбрионов и инактивированных фенолом, лиофилизированный из объема 0,5 мл.
Консервант – фенол в конечной концентрации 0,5 %.
Представляет собой порошок или аморфную массу от желтовато-белого до коричневато-розового цвета.

2. Сыворотка диагностическая к риккетсиям Провачека для РСК. Получена из крови продуцентов (морских свинок или лошадей) после заражения вирулентной культурой риккетсий Провачека, инактивирована, лиофилизирована из объема 0,1 мл.
Стабилизатор – сахароза в конечной концентрации 2 %.
Представляет собой аморфную массу в виде таблетки от желтовато-белого до коричневато-розового цвета.

Показания для применения

Применяют для серологической диагностики эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля.

Режим дозирования и способ применения

1. Определение рабочей дозы комплемента

1.1. Титрование комплемента для основного опыта осуществляют непосредственно перед его использованием.

1.2. Готовят рабочее разведение гемолитической сыворотки, соответствующее утроенному ее титру. Например, при титре 1:1200 к 0,1 мл гемолитической сыворотки добавляют 39,9 мл натрия хлорида раствора 0,9 % (разведение 1:400).

1.3. Готовят гемолитическую систему: смешивают равные объемы 3 % взвеси эритроцитов барана и рабочего разведения гемолитической сыворотки. Гемолитическую систему выдерживают при температуре (36-38) ºС в течение (28-32) мин.

1.4. Готовят разведение комплемента 1:10 в натрия хлорида растворе 0,9 %. Для этого содержимое ампулы растворяют в 10 мл натрия хлорида раствора 0,9%.

1.5. В ряд из 10 пробирок микропипеткой отмеряют от 0,01 до 0,1 мл комплемента, разведенного 1:10.

1.6. Доводят объём в каждой пробирке натрия хлорида раствором 0,9 % до 0,6 мл.

1.7. В каждую пробирку добавляют по 0,4 мл гемолитической системы.

1.8. Перемешивают содержимое пробирок встряхиванием до получения гомогенной взвеси эритроцитов. Пробирки выдерживают в термостате при температуре (36-38) ºС в течение (28-32) мин.

1.9. Результаты реакции учитывают сразу после выдержки и обозначают крестами:
++++ - отсутствие гемолиза: жидкость над осадком эритроцитов не окрашена;
+++ - следы гемолиза: жидкость над осадком эритроцитов слегка окрашена в розовый цвет;
++ - ясный гемолиз: жидкость над осадком красноватого цвета, значительный осадок на дне пробирки;
+ - почти полный гемолиз: жидкость красного цвета, незначительный осадок эритроцитов;
– - полный гемолиз: жидкость красного «лакового» цвета, осадка на дне пробирки нет.

За одну единицу комплемента принимают его количество, содержащееся во второй про-бирке с полным гемолизом (в данном случае 0,07 мл комплемента в разведении 1:10, что соответствует 0,007 мл неразведённого комплемента).

РСК проводят как при температуре 2 – 8 ºС в течение 18 – 20 ч («холодное» связывание), так и при температуре 36 – 38 ºС в течение 55 – 65 мин («горячее» связывание).
Рабочая доза комплемента при «холодном» связывании составляет две единицы, при «горячем» связывании – одну единицу комплемента.

2.Расчет необходимого количества комплемента.
Реакцию ставят в общем объёме 1 мл:
- 0,2 мл разведенной исследуемой сыворотки;
- 0,2 мл диагностикума в рабочем разведении;
- 0,2 мл комплемента в рабочем разведении;
- 0,4 мл гемолитической системы.
Пример расчёта необходимого количества комплемента для постановки реакции методом «холодного» связывания: в приведённом выше примере 2 единицы комплемента соответству-ют 0,007 мл × 2 = 0,014 мл неразведенного комплемента. Для постановки реакции на 100 про-бирках необходимо взять 0,014 мл × 100 = 1,4 мл неразведенного комплемента. При этом количество натрия хлорида 0,9 % раствора, которое должно быть добавлено к данному объему комплемента, составит 0,2 мл × 100 – 1,4 мл =18,6 мл. Таким образом, общий объем комплемента в рабочем разведении на 100 пробирок реакции составит 20 мл.
Для постановки реакции методом «горячего» связывания на 100 пробирках необходимо взять 0,007 мл × 100 = 0,7 мл неразведенного комплемента и развести его в 19,3 мл натрия хлорида раствора 0,9 %.

Меры предосторожности при применении

Набор реагентов специфически безопасен. Входящие в состав набора компоненты инактивированы. Однако исследуемые материалы, сточные растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ними в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, и обращаться с ним следует осторожно. Класс потенциального риска применения по ГОСТ Р 51609-2000 − 2б.
Сточные растворы, пробы, оборудование, находившееся в контакте с биологическими образцами, лабораторную посуду следует обеззараживать в соответствии с СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)» (раздел «Риккетсии»).
Оборудование обеззараживают двукратным протиранием раствором хлорамина 3 % или раствором пероксида водорода 6 % с интервалом 15 мин.

Лабораторную посуду, сточные растворы и пробы обеззараживают:
- погружением в раствор хлорамина 3 % или раствор пероксида водорода 6 % с 0,5 % моющего средства на 2 часа;
- или кипячением в течение 60 мин в растворе соды 2 %;
- или автоклавированием под давлением (0,15±0,015) МПа при (126±2) ºС в течение 60 мин.