Описание
Положительно реагирующие при использовании СИБ тест-штаммы должны изменять цвет субстрата в растворенном виде или цвет полоски в соответствии с таблицей учета результатов исследования.
Форма выпуска
Выпускают в наборе из 13 тестов: 11 флаконов с СИБ-дисками, и 2 пробирки с СИБ-полосками.
Состав
Системы индикаторные бумажные (СИБ) дня идентификации микроорганизмов (набор диагностический) представляют собой диски или полоски хроматографической бумаги, содержащие определенные количества субстрата в сочетании с индикатором, стабилизированные пленкообразующим покрытием - поливиниловым спиртом.
СИБ выпускают в наборе из 13 тестов: 11 флаконов с СИБ-дисками (СИБ с глюкозой, лактозой, сахарозой, маннозой, арабинозой, маннитом, инозитом, лизином, орнитином, аргинином, для определения уреазы) и 2 пробирки с СИБ-полосками (СИБ для определения оксидазы и индола). СИБ-диски выпускают во флаконах, СИБ-полоски в пробирках в картонной пачке с инструкцией по применению.
Набор № 1 обеспечивает проведение 50 анализов.
Показания для применения
Идентификация и дифференциация микроорганизмов рода Vibrio по биохимической активности.
Способ применения
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Основные требования, предъявляемые при работе с набором реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор №1 для идентификации вибрионов»:
- исследования проводят с чистой культурой, а также с отдельными колониями с
питательного агара для выделения и культивирования вибрионов;
- погружение дисков в пробирки производят обожженным пинцетом;
- критерием правильности учета реакции должны быть четкие различия в окраске по
сравнению с контролем (за исключением аминокислот, где в опытной пробирке слабое
зеленое окрашивание свидетельствует об отрицательном результате, в то время как в
контроле диски с аминокислотами окрашены в желтый цвет);
-для получения четких результатов необходимо соблюдение температурного режима термостата (37±1) °С, рН применяемых питательных сред и режима обработки: посуды.
Определение оксидазной активности,
Культуру, выросшую на поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, растирают платиновой петлей или стеклянной палочкой на индикаторной полоске СИБ, помещенной в чашку Петри. На одной полоске можно исследовать 10-14 культур (не более).
Определение утилизации углеводов и многоатомных спиртов.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1 суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с соответствующим углеводом или многоатомным спиртом. Среда в пробирках в результате быстрой диффузии в нее индикатора становится красной. В случае необходимости учета газообразования рекомендуется использовать небольшой комочек стерильной гигроскопической ваты, который помещают в пробирку. В качестве контроля служат СИБ-диски, погруженные в пробирки со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Пробирки инкубируют при температуре (37±1) °С.
Определение индолообразования.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1 суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности ииггательного агара для культивирования мизсроорганизмов в течение 18-24 ч при температур (37±1) °С. Полоску для определения нндола складывают по намеченной на ней линии вдвое и пинцетом опускают на дно пробирки так, чтобы длинный бесцветный конец погрузился в суспензию культуры, а короткий окрашенный: конец находился над поверхностью суспензии. В качестве контроля используют полоску, помещенную в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Инкубируют при температуре (37±1) °С.
Определение уреазной активности.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1 суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с мочевиной. В качестве контроля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Инкубируют при температуре (37±1) °С.
7.6. Определение декарбоксилаз лизина, орнитина и дегидролазы аргинина.
В пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН 5,5±0,2 суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с одной из аминокислот: лизином, орнитином или аргинином и вносят 0,2 мл стерильного вазелинового масла. В качестве контроля используют СИБ-диски с соответствующими аминокислотами, погруженные в пробирки со стерильным фосфатно-солевым буферным раствором рН 5,5±0,2 с добавлением 0,2 мл стерильного вазелинового масла. Инкубируют при температуре (37±1) °С.
Примечание: стерильный натрия хлорида раствор 0,9 % рН 7,3±0,1 готовит потребитель непосредственно перед использованием.
РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.
Регистрацию результатов анализа проводят визуально.
Меры предосторожности при применении
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологаческих учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).
Обезвреживание. Использованные СИБ обезвреживают автоклавированием водяным насыщенным паром под давлением 1,5 кГс/см2 при температуре (126±2) °С в течение 1 часа.
